Imunocitoquímica
Princípios básicos de
Imunocitoquímica
João Ramalho Santos
Departamento de Zoologia
Faculdade de Ciências e Tecnologia
Universidade de Coimbra
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A técnica de imunocitoquímica é utilizada para localizar proteínas numa célula ou população de células (se for num tecido denomina-se imunohistoquímica), e tem como fundamento a utilização de anticorpos específicos (geralmente IgGs, mas também IgMs) contra a proteína que se pretende identificar e localizar numa dada célula. A proteína em questão funciona assim como antigénio. Há inúmeros anticorpos disponíveis comercialmente. Para sintetizar novos anticorpos é necessário imunizar animais contra a proteína/antigénio, injectandoa na corrente sanguínea (uma estratégia idêntica à …exibir mais conteúdo…
PROCEDIMENTO
O problema de usar imunocitoquímica para detectar proteínas intracelulares é que os anticorpos são moléculas bastante grandes, que não têm acesso directo ao citoplasma. Por isso torna-se necessário fixar e permeabilizar as células. A fixação