extracción de la tirosina
Se obtuvieron los extractos enzimáticos de tirosinasa en los frutos (banano, manzana y papa) y se procede a hacer los ensayos de la medida de actividad enzimática en condiciones normales, aumento de temperatura (extracto en baño de agua hirviendo) y presencia de un inhibidor (adición de ácido ascórbico) siguiendo el curso de la ración al interpretar las absorbancias que arroje el fotocolorímetro.
En la práctica se usó la tirosinasa extraída de banano, manzana y papa para ponerla a actuar con el sustrato L-DOPA para finalmente convertirlo en Dopa-Cromo mediante la acción de la enzima cuya concentración puede seguirse usando fotocolorimetría a un λ de 420 nm. Que es donde presenta su máxima absorción.
El procedimiento de …ver más…
pendiente banano 0.04565 pendiente papa 0,04941 pendiente manzana 0,0007
Vmax = pendiente
Actividad enzimática= Vmax/█(volumen de extracto @enzimatico)
-El volumen de extracto enzimático es 1 mL en todos los ensayos.
2.1. Extracto de banano:
Vmax= 0.045 abs/min
Actividad enzimática= (0.045 abs/min)/(1 ml)
Actividad enzimática= 0.045 abs/min×ml
1.2.2. Extracto de papa:
Vmax= 0,049 abs /min
Actividad enzimática= (0,049 abs /min)/(1 ml)
Actividad enzimática= 0,049 abs /min ×ml
1.2.3. Extracto de manzana:
Vmax= 0,0006833 abs/min
Actividad enzimática= (0,0006833 abs/min)/(1 ml)
Actividad enzimática= 0,00068 abs/min×ml
3. Notamos que el extracto en donde la tirosina está trabajando con mayor eficiencia es en la papa, esto lo podemos corroborar observando la grafica y comparando los resultados en los que se determino la actividad enzimática de cada compuesto. Sorpresivamente vemos que a condiciones normales la tirosinasa presente en la manzana tiene una actividad menor que en el banano o la papa.
Actividad enzimática en aumento de temperatura, presencia de un inhibidor y condiciones normales
4. Procedemos a calcular la actividad enzimática para comparar los diferentes comportamientos de la enzima presente en el extracto de banano. Pendientes (banano):
1) Condiciones normales 0,0457.
2)