UNMSM – FM – TM - RAD. 2013-II

PRÁCTICA N° 3 DE BIOQUÍMICA Y NUTRICIÓN

DIGESTIÓN ENZIMÁTICA DEL ALMIDÓN

COMPETENCIAS

Al finalizar la práctica, el alumno será capaz de:
1. Realizar experimentalmente la digestión enzimática del almidón por acción de la alfa – amilasa.
2. Evaluar de forma experimental el efecto de cloruro de sodio y del pH sobre la actividad enzimática de amilasa.
3. Identificar cualitativamente la presencia del sustrato de la reacción enzimática.
4. Identificar cualitativamente los productos de la reacción enzimática.

INTRODUCCION

El almidón se encuentra en las plantas en forma de gránulos. Estos gránulos se hallan principalmente en las semillas, frutos, tubérculos y raíces de la …ver más…

La prueba se basa en una reacción física y no química, en la cual el almidón reacciona con el yodo para formar un complejo de color azul intenso. Bajo las mismas condiciones, el glucógeno da una coloración café.

PARTE EXPERIMENTAL

COLECCIÒN DE LA SALIVA
Antes de la colección se procederá a un enjuague simple de la cavidad oral con agua; luego manteniendo la boca cerrada esperará entre 5 a 7 minutos evitando hablar y pasar saliva. La colección se realizará en un beaker dejando caer por gravedad la saliva, evitando así la formación de espuma.

DILUCIÒN DE LA SALIVA
En un tubo de ensayo colocar 1 mL de saliva y agregar 5 mL de agua destilada. Mezclar por inversión .Se obtiene así la saliva diluida.

TÉCNICA
Preparar una batería de tubos como sigue:

TUBOS DE DIGESTION
1
2
3
mL de almidón al 1%
1.0
1.0
1.0
mL de buffer fosfato pH 6.8 0.1 M
0.5
0.5
-
mL HCl 0.5 N
-
-
1.2
mL H2O destilada
-
1.2
0.5
mL NaCl 2,4 g/dL
1.2
-
-
mL saliva diluida
0.5
0.5
0.5

Incubar en baño Maria de 37 °C por 10 minutos y cada 3 minutos agitar el tubo.
Luego retirar del baño María y agitando previamente los tubos de la digestión preparar las siguientes baterías:

REACCIÓN DE LUGOL : Identifica la presencia de almidón por la aparición de una coloración azul oscura.

TUBOS
1
2
3
Digerido 1 mL
1.0
-
-
Digerido 2 mL
-
1.0
-
Digerido 3 mL
-
-
1.0
HCl