Southernn Blot
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SOUTHERN BLOTSouthern blot, hibridación Southern o, simplemente, Southern es un método de biología molecular que permite detectar la presencia de una secuencia de ADN en una mezcla compleja de este ácido nucleico. Para ello, emplea la técnica de electroforesis en gel de agarosa con el fin de separar los fragmentos de ADN de acuerdo a su longitud y, después, una transferencia a una membrana en la cual se efectúa la hibridación de la sonda.
GRÁFICO DE LA TÉCNICA DE SOUTHER BLOT
Tipo de sonda que se emplea en esta técnica
Si se trata de DNA, la técnica se llama Southern blot. Se utilizan sondas de DNA (moléculas de DNA marcadas con radioactividad y con una secuencia conocida) para identificar qué bandas del gel contienen secuencias …ver más…
GRÁFICO DE LA TÉCNICA DE NORTHERN BLOT
Tipo de sonda: * Si se trata de RNA, la técnica se llama Northern blot. Se utilizan sondas de RNA (moléculas de RNA marcadas con radioactividad y con una secuencia conocida) para identificar qué bandas del gel contienen secuencias complementarias a la de la sonda.
APLICACIONES MÉDICAS En estudios de la modulación de la síntesis de interleucina 6 en pacientes con artritis reumatoide. En el análisis de expresión de receptores que participan en la síntesis de moléculas en cultivos celulares. En análisis de mutaciones y alteraciones del RNAm de enzimas.
VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE ESTE MÉTODO Ventajas:
No se realiza una electroforesis previa sino que se carga en la membrana soporte la muestra a analizar, y se la somete a la reacción colorimétrica.
Permite una estimación cualitativa y cuantitativa del antígeno.
Desventajas:
Un problema común del northern blot es que la degradación de la muestra por RNAsas (endógenas de la muestra o a través de contaminación ambiental) que puede ser evitada por una apropiada esterilización de los materiales asó como el uso de inhibidores de RNAsas como el dietilpirocarbonato
ARTICULO (ABSTRACT) EN QUE SE EMPLEÓ ESTA TÉCNICA PARA EL ESTUDIO
WESTERN BLOT
Es un método en biología molecular/bioquímica/inmunogenética para la detección de proteínas en una muestra de un tissue homogeneizado o extracto. Implementa gel