Separacón de proteinas por electroforesis en gel de poliacrilamida
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OBJETIVOS Efectuara la separación de proteínas de varias muestras mediante la técnica de electroforesis en gel de poliacrilamida. Determinara cual es el tamaño “óptimo” de poro del gel, para la mejor separación de cada una de las muestras.DATOS EXPERIMENTALES E INFORME
Tabla 1. Características de los electroferogramas a diferentes % T
%T 5.5 7.5 10 12.5
Característica
Longitud del gel antes de teñir, cm (l) 7.2 6.5 6.8 7.2
Longitud del gel después de teñir, cm (l’) 8.4 7.0 7.3 8.3
Distancia recorrida por el colorante, cm, (f) 5.7 5.5 5.8 6.3
Tabla 2. Movilidad electroforética relativa promedio.
%T Proteína Valores de m (cm) Distancia promedio recorrida m (cm) M Log
(M X 100) Nº de bandas
5.5 Suero 5.8 6.2 6.1 6.03 …ver más…
Defina el termino electroferograma
Gráfico realizado con los resultados de un análisis por electroforesis Concluya acerca del tamaño del tamaño molecular relativo de las proteínas y sus cargas eléctricas relativas al pH del regulador de trabajo (8.7 a 9.1)
Yogurt: y = -0.0262x + 2.1707
R² = 0.8271
Suero: y = -0.0402x + 2.2292
R² = 0.7086
Clara: y = -0.0248x + 2.1416
R² = 0.6513
Leche: y = -0.0195x + 1.9227
R² = 0.2013
La proteína que tiene mayor tamaño es la seroalbumina, seguida por la caseína del yogurt, la ovoalbúmina y la caseína de la leche.
La proteína con mayor carga es la seroalbumina seguida por la caseína del yogurt, la ovoalbúmina y la caseína de la leche.
DISCUSION
Realizamos electroforesis en gel de poliacrilamida con el fin de separar proteínas provenientes de diferentes muestras, en este caso leche, suero, yogurt y clara de huevo.
Como soporte se utilizo poliacrilamida ya que esta tiene características como: ser químicamente inerte, de propiedades uniformes, se prepara de forma rápida, forma geles transparentes, insolubles en agua, relativamente no iónicos y que permiten buena visualización de las bandas durante tiempo prolongado. Además de tener la ventaja de que variando la concentración de acrilamida y bis-acrilamida, se puede modificar de manera controlada el tamaño del poro.
Las bandas que presentaron una mayor coloración (observar figura 1) son las proteínas que en cada muestra se encuentran en mayor concentración; para el