Universidad de Alcalá
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular
Bioquímica. 2º de Farmacia. Curso 2010/11

Problemas de cinética enzimática
1.- En un cultivo de bacterias, la velocidad de reacción de un enzima E fue de
20 µg/min para una concentración de sustrato de 3 mM. Si la concentración de sustrato es igual o superior a 7 mM, la velocidad no supera los 40 µg/min. Al añadir un inhibidor competitivo, la velocidad de la reacción fue de 20 µg/min para una concentración de sustrato de 8 mM. Calculese la Km, la Vmax y la Ki para este enzima, sabiendo que la concentración de inhibidor añadido es de 6 mM. a) Vmax: Si para una [S] ≥ 7 mM la velocidad es 40 µg/min, la Vmax=40 µg/min
b) Km: ½ Vmax será 20 µg/min, como esta …ver más…

Determinar la Km para el enzima y la Ki para el complejo enzima-inhibidor. ¿Cuál es la velocidad máxima?
[S] mM
2
3
4
10
15

µg producto/h
(sin inhibidor)
139
179
213
313
370

µg producto/h
(6 mM inhibidor)
88
121
149
257
313

Se calculan los inversos de [S], producto sin inhibidor y producto con inhibidor, se representa y = 1/V frente a x = 1/[S]
Sin inhibidor:
La línea corta en y = 2x10-3, entonces 1/Vmax = 2x10-3, luego Vmax = 0,5x103 µg/h La línea corta en x = -2x10-1, entonces -1/Km = -2x10-1, luego Km = 5 mM

Con inhibidor:
Como es un inhibidor competitivo la Vmax es la misma en presencia y ausencia de inhibidor.
La línea corta en x = -1,1x10-1, entonces -1/Km = -1,1x10-1, luego Km=9 mM
La Ki se calcula como en el ejercicio 1 Ki = 7,5 mM

4.- Habiéndose conseguido aislar de Salmonella tyfpimurium una enzima que cataliza
la