Precipitacion De Proteinas
Departamento de Ciencias Químico-Biológicas
Laboratorio de Bioquímica 1
“Precipitación de Proteínas”
Diana Bosbach Estrada
Fernanda Moreno
Nicolle Montaño
Lunes, 09 de mayo del 2011.
OBJETIVO
En esta sesión de practicarán las diferentes formas de precipitar a las proteínas * Precipitación por salación o salting out. * Precipitación por solventes orgánicos. * Precipitados por formación de sales. * Reacción de Biuret
INTRODUCCIÓN
Precipitación de proteína:
La precipitación de las proteínas es uno de los procedimientos más empleados en los procesos metodológicos de la bioquímica moderna. De ahí que sea necesario tener claros los principios en que se basan los diversos tipos de …ver más…
Si esto sucede arriba de cero grados, las proteínas se desnaturalizan, de ahí que ese tipo de precipitación cuando se usa para purificar proteínas con actividad biológica como las enzimas, se tenga que hacer a bajas temperaturas. En este tipo de precipitación si hay que tener en cuenta factores como el pH, electrolitos, presencia de metales pesados, etc., pues pueden tener efecto en la precipitación.
Precipitación por formación de sales
Las proteínas precipitan de sus soluciones por algunos tipos de metales pesados como cloruro de mercurio, nitrato de plata, sulfato de cobre, etc. El ion del metal pesado muy probablemente se combinan con la forma aniónica de la proteína.
La proteína en el lado alcalino de su punto isoeléctrico, existe como ion negativo, y asi, al combinarse con el ion del metal o catión formara lo que podríamos llamar “proteinatos”, por ejemplo: proteinato de mercurio, proteinato de plata, etc.
En cambio, los reactivos llamados “reactivos alcaloidales”, que son ciertos acidos como el pícrico, el fosfotungsico, el tánnico, el metafosfórico, etc, precipitan la proteína al combinarse el radical acido del reactivo, con la forma cationica de la proteína que predomina en el lado acido de su punto isoeléctrico. Se forma entonces un precipitado que podríamos llamar, por ejemplo: tannato de proteína, fostotungstato de proteína, tricloroacetato de proteína.
La mayoría de las globulinas animales se