Práctica No. 2: Reacción De La Deshidrogenasa Succinica Y De La Citocromo Oxidasa
LICENCIATURA EN CIENCIAS NUTRICIONALES
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA II
PRÁCTICA NO. 2: REACCIÓN DE LA DESHIDROGENASA SUCCINICA Y DE LA CITOCROMO OXIDASA
DRA: MARIBEL PLASCENCIA JATOMEA
PARTICIÓN 2 EQUIPO 10:
GALVEZ PACHECO DANITZA ALEJANDRA
LÓPEZ COVARRUBIAS MELISSA
WONG CHAN EVA JESSENIA
HORARIO:
8:00 – 10:00 HRS.
VIERNES 12 DE OCTUBRE DE 2012.
Introducción. La enzima Succínico Deshidrogenasa está siempre unida al sistema Citocromo Oxidasa, por lo que no hay un método que separe bien a la Succínico Deshidrogenasa de las inclusiones celulares. Por lo tanto, las pruebas para esta enzima se deben llevar a acabo en presencia de alguno o de todos los componentes del sistema …ver más…
* 1 mortero. * 1 gradilla. * 2 vasos de precipitados de 500 ml. * 1 mechero, tripié y tela de asbesto. * 1 termómetro. * Un cuchillo o navaja. * Un poco de arena. * 100 g de corazón de res.
Resultados y Observaciones.
Peso de corazón de res: 22g aprox.
Al molerlo con 55mL de Buffer se reduce el volumen para concentrar la mayor parte de enzimas posibles.
Al centrifugar los tubos con solución enzimática presentaron una sedimentación (color: rojo opaco)
Reacciones al calentar:
En el calentamiento a 37°C: Determinación de la actividad deshidrogenasa succínica.
Tubo # | Contenido | 10 min. | Resultados | 1 | * Succinato * Malonato * Azul de Metileno * Extracto | Color verdoso claro | Reacción inhibida por el malonato. | 2 | * Succinato * Agua destilada * Azul de Metileno * Extracto | Color azul verdoso con tonos café. | Reacción positiva | 3 | * Agua destilada * Azul de Metileno | Azul | Control |
En el calentamiento a 37°C: Determinación de la actividad de la citocromo oxidasa.
Tubo # | Contenido | 10 min. | Resultados | 1 | * Agua destilada * p-feliendiamina * Extracto | Color naranja-café pálido. | Reacción positiva | 2 | * Cianuro * p-feliendiamina * Extracto | Color naranja-café mas intenso que tubo 1 | Reacción inhibida por el cianuro. | 3 | * Agua destilada * p-feliendiamina | Incoloro | Control |
Discusiones.
En la