Inhibición De La Lactato Deshidrogenasa
Departamento de Bioquímica, Facultad de Química, UNAM, México, D. F., 04510, México.
Efecto de la concentración de Piruvato y Oxamato en la actividad de la LDH
Departamento de Bioquímica, Facultad de Química, UNAM, México, D. F., 04510, México.
Introducción
LA LDH es una L-lactato; NAD+ oxidoreductasa. Es una enzima importante el al metabolismo anaerobio de la glucosa para el ATP. Cuando disminuye el O2 celular o bien el pH es cercano a 7, la enzima cataliza la conversión de piruvato a lactato con la concomitante conversión de NADH a NAD+. La velocidad de la reacción se ve disminuida por la interacción de la enzima con un inhibidor tal como el Oxamato, el …ver más…
Tabla 2. Actividad enzimática específica con piruvato y con piruvato + oxamato Piruvato mM | Actividad enzimática especifica (mmol min-1 mg-1) | Actividad enzimática especifica (mmol min-1 mg-1) Con inhibidor (oxamato) | 0.06 | 0.01676546 | 0.00269736 | 0.09 | 0.0223927 | 0.00346471 | 0.15 | 0.02815946 | 0.00525519 | 0.25 | 0.0345308 | 0.00955701 | 0.36 | 0.03990226 | 0.01032436 | 0.5 | 0.0390419 | 0.01388208 |
Se grafico actividad específica contra concentración de piruvato.
Gráfico 1. Gráfico de Michaelis-Menten de la reacción catalizada por la enzima lactato deshidrogenasa en presencia y ausencia de inhibidor.
Gráfico 2. Gráfico de Lineaweaver-Burk de la reacción catalizada por una enzima en presencia y ausencia de inhibidores.
Con la regresión lineal obtenida en el grafico de Lineaweaver-Burk se calculo la Km y Vmax en ausencia y presencia del inhibidor oxamato. Tabla 3 | En ausencia de inhibidor | En presencia del inhibidor | Km (mM) | 0.121 | 0.578 | Vmáx (mM min-1) | 0.051 | 0.027 |
Tabla 3. Km y Vmax en ausencia y presencia del inhibidor oxamato
Discusión
Al determinar los parámetros