ESTUDIO CINÉTICO DEL ENZIMA ALFA – AMILASA: EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN, EL pH Y LA TEMPERATURA SOBRE LA VELOCIDAD DE UNA REACCIÓN ENZIMÁTICA.

Palabras clave: almidón, enzima, alfa amilasa, temperatura, pH, reacción, velocidad, desnaturalización, tiempo, lugol.

RESUMEN

La cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones catalizadas por enzima; la velocidad de una reacción puede medirse mediante condiciones óptimas de pH, temperatura, concentración del sustrato del enzima y el tiempo de reacción, utilizando el lugol como una herramienta útil ya que el almidón en presencia de esta solución adquiere una coloración azulada. Cuando se realizó la prueba de pH para medir la reacción se pudo observar que con pH 7.0 la prueba del …ver más…

Cuando la alfa amilasa actúa, degrada la amilosa, se desintegra la hélice y por tanto en presencia de lugol ya no dará una coloración azul. [1]

Para determinar el efecto de la [E] sobre la velocidad de la reacción enzimática, se realizó una disolución enzima así: adicionando 1mL de saliva en la probeta y se diluyo con 20 mL de agua destilada; luego se tomaron 4 tubos de ensayo y se añadió 2 mL de disolución de almidón al 0.5 % a cada uno y se le agrego 0,1: 0,2: 0,3 y 0,4 mL (respectivamente a cada tubo) de disolución de enzima. Después se completó hasta un volumen de 0,5 mL con agua destilada y se puso a correr el cronometro, en intervalos de 10 minutos se hizo la prueba de coloración de lugol, donde se pudo observar que en los primeros 10 minutos de empezada la reacción el tubo número 3 es decir el tubo que contenía 0.3 mL de solución enzima dio negativo al lugol, mientras que los tubos 1, 2 y 4 presentaron un color azul (positivas al lugol), al transcurrir el tiempo (20 min) se pudo observar que el tubo numero 4 (0.4 mL de solución enzima) dio negativo al lugol, mientras que el tubo 1 y 2 seguían siendo positivas a este, pasados otros 10 minutos, es decir 30 minutos de reacción los tubos 1 y 2 se tornaron de color amarillo es decir actuaron positivamente al lugol.

Todas las enzimas tienen dos valores límite de pH entre los cuales son efectivas. Traspasados estos valores, la enzima se