1PRACTICA N° 8
Cuantificación de nitrógeno total y determinación del contenido de proteína cruda
I. Introducción: El nitrógeno es el elemento químico que permite diferenciar las proteínas de otros compuestos, particularmente de grasas y carbohidratos. Sin embargo, la fracción de proteína del sistema biológico no es la única fuente de nitrógeno ya que puede derivarse también de pépticos, aminoácidos libres y compuestos nitrogenados de naturaleza no proteica (generalmente presentes en menor proporción). Por ello al determinar el contenido de nitrógeno en un sistema biológico se califica de nitrógeno total y al utilizar este dato para calcular el porcentaje de proteína del sistema se califica de “cruda”. La determinación del nitrógeno sigue …ver más…

Hidróxido de sodio al 50 % (NaOH)
6. Ácido sulfúrico o ácido clorhídrico al 0,1 N (HCl)
7. Rojo de metilo al 0,1 % en alcohol de 95 % (cuando se recoge el destilado en H2SO4 0,1 N)
8. Hidróxido de sodio 0,1 N (cuando se recoge el destilado en H2SO4 0,1N)
9. Mezcla indicadora rojo de metilo 0,1 % - azul de metileno 0,05 %, en alcohol de 95 %; o rejo de metilo 0,1 % - verde de bromocresol 0,075 %, en alcohol de 95%.
10. Ácido bórico al 4% (H3BO3)
C. Materiales:
1. Equipo de MacroKjedahl para digestión y destilación.
2. Balones de Kjeldahl.
3. Papel tornasol rosado.
4. Equipo de MicroKjedahl para digestión y destilación.
5. Balones de MicroKjeldahl.
6. Equipo Kjeldahl automatizado
D. Procedimiento:
1. Digestión:
1. Pesar 0,7 – 2,2 g de muestra sobre un trozo de papel de filtro sin cenizas e introducir papel y muestra en el balón de digestión Kjendahl
(evitar que quede muestra adherida al cuello del balón).
Universidad Central de Venezuela. Facultad de Ciencias. Escuela de Biología. Departamento de Tecnología de Alimentos. Asignatura Análisis de Alimentos. Actualizado por Profª. Myrna Medina.
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2. 4Añadir de 15 – 18 g de sulfato de potasio; 0,5 g de sulfato cúprico anhidro y 25 ml de ácido sulfúrico concentrado.
3. Añadir unas perlitas de vidrio (solo en el caso del MacroKjeldahl y una cantidad adecuada de antiespumante).
1. Colocar el balón en el aparato de digestión y calentar la mezcla de digestión a temperatura baja