Práctica 1.
Determinación de la Actividad de la Enzima Succinato Deshidrogenasa. Función de cada reactivo. Azul de metileno.- Tiene la función de ser el aceptor de electrones del complejo succinato-FADH2 Ácido Succinico.- Tiene la función de reducir al azul de metileno, ya que éste es reducido en lugar del succinato. Aceite de bebé.- Tiene la función de aislar el tubo del aire del ambiente y así prevenir la oxidación temprana del FADH2. Fenol.- Inhibe la actividad de las enzimas ya que desnaturaliza las proteínas.
Fichas de seguridad. Ácido Succinico C4H6O2. * Causa irritación a los ojos, piel y vías respiratorias. * No debe ingerirse, puede causar malestar estomacal. * Genera productos peligrosos en la …ver más…

* Por contacto con piel, lavar con agua y jabón. * Por contacto con los ojos, lavar con abundante agua durante 10 minutos, manteniendo los párpados abiertos. * Por ingestión, enjuagar la boca y beber bastante agua.
Objetivo.
Que el alumno aprecie la actividad de la enzima succinato deshidrogenasa mediante una reacción colorimétrica.
Observaciones y cálculos. Procedimiento. 1. Se pesó aproximadamente 1 g de hígado de rata. 2. Se molió con 3 ml de ácido succínico neutralizado a pH fisiológico. 3. Se transfirieron partes iguales a cada tubo y se procedió a agregar los reactivos según la siguiente tabla. Reactivo | Número de tubo | | 1 | 2 | Fenol al 90% | 1.0 | - | Azul de metileno | 2 gotas | 2 gotas | Mezclar cada tubo. | Aceite mineral. | 0.5 ml | 0.5 ml | 4. Una vez agregados los reactivos en el orden correspondiente, se procedió a calentar los tubos a baño maría durante 10 minutos. 5. Finalmente se observaron los cambios.
Resultados.
Al agregar los reactivos en los dos tubos siguiendo las indicaciones de la tabla se colorearon ambos tubos con el color característico del azul de metileno oxidado (verde azulado). Una vez calentado a baño maría los dos tubos se encontró que el tubo número 2 había cambiado su cloración. En el tubo 2, no se agregó fenol y fue en este en el cual cambió el color de azul a un color marrón característico del hígado molido. Discusión de resultados. De manera