Catalasa y deshidrogenasa láctica
Introducción
El subgrupo 1.11. de la clasificación de las enzimas incluye proteínas que utilizan el peróxido de hidrogeno como oxidante. La catalasa (E.C.1.11.1.6) (peróxido de hidrogeno: peróxido de hidrogeno oxireductasa) es una enzima ampliamente distribuidos en la naturaleza y muy importante pues su función es la destrucción del peróxido de hidrogeno, producto de varias oxidaciones biológicas. Es muy semejante en estructura y función a la peroxidasa. La descomposición del peróxido de hidrogeno se puede considerar como la oxidación de una molécula por otra. De ahí que la siguiente ecuación describa la reacción:
Catalasa
H2O2 + H2O2 O2 + 2H2O2 La catalasa del hígado …ver más…
Después de agregar los reactivos se añade un poco de aceite mineral a los tubos de ensaye, para evitar el contacto de la mezcla de reacción con el oxigeno atmosférico, que haría reversible la reacción
***Nota: En vez de usarse la suspensión de levaduras que tiene poco lactato, usaremos leche entera, además nos ahorra tiempo.***
Procedimiento
1. Coloque en la gradilla 3 tubos de ensaye enumerados 1 a 3
2. Agregue 5ml de azul de metileno al 0.02% a cada uno de los 3 tubos
3. Agregue 10 gotas de lactato de sodio al 5% a los tubos 1 y 2
4. En un tubo de ensaye aparte, tome 5ml de leche y caliéntela en un baño de agua hirviendo por cinco minutos. Agréguela al tubo 2
5. Agregue 5ml de leche sin calentar a los tubos 1 y 3
6. Mezcle bien, y cubra los tubos con una capita de aceite mineral, inclinando los tubos y dejando que el aceite corra por la pared del tubo lentamente.
7. Coloque los tubos en baño de agua a 37°C y observe agite suavemente los tubos.
Observaciones:
Tubo 2 se precipito
Tubo 3 se hizo reacción produjo espuma
Tubo 4 se produjo espuma y se perdió color
Tubo 1 color carne
Después de 5 minutos de hervir
Tubo 1 tomo un color verde
Tubo 3 tiene presipitado perdió color y produjo espuma
Después de 3