LABORATORIO No. 18
AISLAMIENTO DE ARN EN LEVADURA

Objetivos: 1. Aislar muestras de ARN provenientes de levadura.

Marco teórico:
Los ácidos nucleicos son compuestos nitrogenados de elevado peso molecular que se pueden encontrar en las células asociadas a proteínas formando complejos llamados núcleo-proteína. Estas proteínas tienen carácter básico mientras que los ácidos nucleicos son ácidos. Se conocen dos grupos de ácidos nucleicos: ARN (acido ribonucleicos) y el ADN (acido desoxirribonucleico). La hidrólisis controlada de ARN y ADN produce nucleótidos. Si la hidrolisis continua se produce nucleósidos y finalmente fosfatos, azucares y bases púricas y pirimidínicas.
El producto básico de extracción de ARN consiste en el …ver más…

En la precipitación con sulfato de amonio se observo una turbidez del medio y un precipitado blanco, esto nos indicaba la presencia de ARN en el extracto de ácido nucleico, ya que los polinucleótidos del ARN pueden precipitarse en presencia de soluciones salinas concentradas o por efecto de alcoholes en presencia de sales. Se utilizo el sulfato de amonio porque es un excelente componente para la llamada precipitación fraccionada, porque, entre otras cosas, hace que el agua compita entre la disolución de esta sal o de la proteína (formada por muchos grupos carboxilo y amonio), causando que precipite la proteína.
En la prueba de difenilamina el complejo azul-verdoso nos indica presencia de desoxirribosa y por tanto también de ADN. De este modo pareciera como si estos extractos transformadores pudiesen contener un poco acido de desoxirribosa, además de la gran cantidad de acido ribonucleico presente. El complejo azul-verdoso se forma ya que el ARN presente se hidroliza en medio ácido y con calor y en presencia de difenilamina.
En la prueba de Orcinol, la ribosa del ARN en presencia de orcinol, reacción formando una coloración avellana, pero aunque la prueba no haya dado una notable coloración verdosa no podemos decir que la prueba sea negativa porque las levaduras poseen estos compuestos, ya que en sus células se contienen información genética aunque sea mínima en el núcleo.

Conclusiones

* El ARN