El herpes simplex recurrente, el herpes zoster y el
herpes genital son infecciones frecuentes que afectan un
porcentaje elevado de la población provocando un
impacto social importante, ya que las diversas terapias
antivirales conocidas tienen resultados controversiales. En este
trabajo estudiamos el efecto
tópico de una mezcla de alcaloides solanáceos en 90
pacientes, de los cuales 54 cursaban con Herpes simplex,
27 con Herpes zoster y 9 con Herpes genitalis.
Todos los pacientes presentaron mejoría y/o
desaparición de los signos y síntomas en un
lapso de 5 a 10 días con ausencia de las recurrencias en un
90 % de los casos y alargamiento del lapso de aparición de
las mismas en el 10 % de los pacientes con herpes simplex durante
el año siguiente de iniciado el tratamiento, diferente a lo
observado con otras terapias conocidas.
Palabras claves: Herpes simplex, Herpes zoster,
Solanáceas, glicoalcaloides, tratamiento clínico,
Solamargina, ensayos
clínicos.
Abstract
Topical treatment of herpes simplex, herpes zoster and
genital herpes with a mixture of solanaceouas glycoalkaloids.
Recurrent herpes simplex, herpes zoster and genital herpes
are common infectious diseases which affect many people and
produce important social impact since known antiviral therapies
have controversial results. In this paper we study the effect of
a mixture of Solanum alkaloids extracted from Solanum
americanum Miller, which contains mainly solamargine and
solasonine and a low proportion (<5%) of mono- and
diglycosides, applied topically as a cream to 90 patients, 54 of
them with Herpes simplex, 27 with Herpes zoster and
9 with Herpes genitalis. Symptoms of infection disappeared
from all patients in a period of 5 to 10 days. One year after
treatment, 90 % of the patients did not show signs of recurrence,
in the remaining 10% reappearance of the infection was
delayed.
Key words: Herpes simplex, Herpes zoster, Herpes
genitalis, Solanaceae, glycoalkaloids, solamargine, clinical
trials
Las infecciones cutáneas producidas por adenovirus
son frecuentes. Las variedades clínicas son múltiples,
pero las más comunes son las producidas por el virus del herpes simple (VHS) y
el virus Varicela- zoster (VVZ) (Hirsch 1997, Joklik et
al. 1980). El VHS produce una erupción vesicular aguda que
cursa con sensación de ardor y prurito con vesículas
agrupadas sobre una base eritematosa, generalmente alrededor de
la boca, los ojos o genitales. La presentación más
frecuente del HS es la forma facial , y de estas, la labial
recurrente. Algunas veces, cuando se localiza en los ojos, se
produce queratitis y queratoconjuntivitis. Le sigue en
importancia el herpes genital (HG). Una característica de la
afección es su recurrencia, la cual es precipitada por
traumas físicos, quemadura solar, estrés, fatiga y fiebre. Aparentemente estos
factores activan la fase latente del virus (Hirsch
1997).
El VVZ produce dos entidades clínicas diferentes:
la varicela y el herpes zoster (HZ) el cual representa una
reactivación del VVZ latente localizado en la raíz
dorsal del ganglio. El HZ conocido también como "zona" o
"culebrilla", se caracteriza por vesículas que se disponen
en grupos a lo largo de un trayecto
nervioso sobre una base eritematosa. Las localizaciones más
frecuente son el tórax, la cara y el cuello.
La infección recurrente por VHS es un problema
común que afecta a un porcentaje importante de la
población. La frecuencia de la enfermedad varía y puede
ser desde raros episodios esporádicos hasta mas de doce
recurrencias al año. El dolor que produce, el aspecto
clínico antiestético, el impacto psicoemocional
asociado en muchas oportunidades a incapacidad laboral y ausencia escolar, hace
que el paciente busque una terapia segura, rápida y efectiva
(Spruance et al. 1997, Whitley 1997).
En ese sentido se han intentado diversos ensayos
clínicos con medicamentos antivirales y los resultados han
sido controversiales (Hirsch 1997, Joklik et al. 1980, Whitley
1997).
Entre los medicamentos desarrollados con actividad
antiviral podemos mencionar el Aciclovir y otros análogos
nucleósidos y la Idoxuridina (Huff et al. 1988, Sacks et al.
1996, Saral et al. 1981, Spruance et al. 1997, Whitley et al.
1996). Cada uno de ellos tiene uso limitado, son terapias muy
costosas y una vez establecido completamente el cuadro
clínico viral, su efectividad se reduce y el tratamiento
debe acompañarse de astringentes, analgésicos y/o
antineurálgicos. Aún cuando los resultados
terapéuticos son desalentadores, su uso se justifica en las
fases prodrómicas o iniciales del proceso. Estas circunstancias
han motivado la búsqueda de compuestos naturales o
sintéticos que tengan actividad antiviral, con una baja
toxicidad y desde el punto de vista económico, asequibles.
El Solanum americanum Miller (Pittier 1978, Roig y Mesa
1974) es una planta herbácea que crece espontáneamente
en los alrededores de la ciudad de Mérida y que está
ampliamente distribuida en todo el territorio nacional; sus
frutos contienen alcaloides esteroidales, particularmente
solamargina, solanidina y solasonina Figura 1).
Esta planta, conocida vulgarmente como yerbamora, tiene
antecedentes históricos de su uso por la población
rural en forma de cataplasmas o zumo de las hojas, para curar la
"culebrilla", el impétigo, eczemas, etc. (Pittier 1978,
Pompa 1982, Roig y Mesa 1974). Algunas preparaciones conteniendo
glicósidos de solasodina son utilizadas en el tratamiento
del cáncer en la piel (Cham et al. 1991). Otros
glicoalcaloides como la solamarina inhiben el sarcoma 180 en
ratones (Kupchan et al. 1965) y glicoalcaloides como la
solamargina y la solasonina presentan propiedades
antifúngicas (Fewell 1994). Orientados por el uso popular de
la planta en el tratamiento de enfermedades virales, se decidió
extraer y urificar los glicoalcaloides presentes en los frutos
del Solanum americanum con el objeto de verificar sus
posibles propiedades curativas incorporando extractos en
diferentes etapas de purificación a una crema
hidrofílica para su aplicación tópica en un primer
estudio clínico (Chataing 1996) y en el presente estudio
utilizando una mezcla de alcaloides al 1%, disueltos en
ácido acético al 10%, en una base de crema
hidrofílica.
Extracción, aislamiento e identificación
de a-
Solamargina y -Solasonina . Frutos frescos (770 g) de
Solanum americanum Miller fueron lavados con 250 ml de
agua destilada, cortados
finamente y licuados. Se añadió medio litro de una
solución de ácido acético al 5% y se hirvió
durante 5 minutos. Se añadió luego 500 ml de metanol y
se dejó en reposo durante tres días a temperatura ambiente.
Transcurrido este tiempo se filtró. El
filtrado se calentó a 70º C y se precipitaron los
alcaloides agregando NH4OH hasta pH 12. Los sólidos se
resuspendieron en ácido acético al 5% y se precipitaron
nuevamente los alcaloides añadiendo NH4OH en caliente hasta
pH 12.
El precipitado se decantó, se filtró en
frío y se lavó con una pequeña cantidad de agua
fría a la que se añadió una gota de NH4OH. El
precipitado se secó en una estufa a 45º C,
obteniéndose 1.15 g de alcaloides crudos que se disolvieron
en metanol y se cromatografiaron sobre una columna abierta de gel
de sílice, la cual fue eluída con una mezcla de CHCl3/
MeOH / H2O comenzando con 140 :10 :1 ;se recolectaron fracciones
de 100 ml. Las fracciones 37-46 eluyeron con la mezcla de
solventes en una proporción de 90 :10 :1 lo que
permitió recuperar 128 mg de solamargina y las fracciones
69-100 eluidas con la misma mezcla de solventes permitió
obtener 152 mg de solasonina. Las fracciones fueron analizadas
por TLC sobre placas de
sílica gel usando CHCl3/ MeOH /1% NH4OH (2:2:1, fase
inferior) como solvente.
Solasonina y solamargina mostraron Rf 0.32 y 0.22,
respectivamente. Un análisis de las muestras
por HPLC, utilizando una columna -Bondapak CN revela la
existencia de dos picos principales que corresponden
fundamentalmente a Solamargina en mayor proporción y
Solasonina. Los otros pequeños picos (< 5%) parecen
corresponder a mono- y diglicósidos de
Solasonina.
La identidad de los
glicoalcaloides fue confirmada por espectros de 13C-NMR
comparados con los valores reportados por
Mahato et al. 1980. La mezcla de solamargina-solasonina fue
utilizada para la preparación de la crema hidrofílica
aplicada para pacientes con Herpes disolviendo los
glicoalcaloides en ácido acético al 10 %.
Ensayos de actividad y estabilidad
La actividad biológica de las muestras con
extractos alcaloideos se determinó en medios de cultivo conteniendo
las siguientes células: Trypanosoma
cruzi (Chataing 1998), levaduras y hongos. El compuesto en la forma
de crema fue estable por lo menos durante un año tanto a
temperatura ambiente como a 4C sin pérdida
de actividad.
Preparación de la crema usada como vehículo
para los alcaloides.
A 100 g de la crema se le agregó la mezcla de
glicoalcaloides (1g) disuelta en ácido acético para
obtener una crema al 1% en glicoalcaloides con cerca del 95 % de
Solamargina.
Estudio de los pacientes
Se estudiaron 90 pacientes de edades comprendidas entre
11 y 84 años, con enfermedad herpética diagnosticada
clínica y citológicamente (citodiagnóstico de
Tzanck ) y en los casos que lo ameritaba, a través de
biopsias. De ellos, 54 con HS, 27 con HZ y 9 con HG. De los 54
pacientes con HS, 18 (33.3 %) fueron del sexo masculino y 36 (66.7 %)
del sexo femenino (Tabla 1).
Tabla 1. Pacientes con herpes simple
facial.
Fuente: Unidad de Dermatología. Hospital
Universitario de los Andes.
De los 27 pacientes con diagnóstico de HZ, 13
eran femeninos (48.2%) y 14 masculinos (53.8%)(Tabla 2); y de los
9 pacientes con HG, 8 fueron masculinos (87.5%) y 1 femenino
(12.5 %) (Tabla 3).
Tabla 2. Pacientes con Herpes zoster.
Fuente: Unidad de Dermatología. Hospital
Universitario de los Andes.
Los pacientes fueron interrogados acerca de la
frecuencia después de la primera infección, de los
tratamientos anteriores, particularmente con aciclovir oral o
tópico. Se insistió en cuanto a la presencia de
prurito, ardor, quemazón, de vesículas, pústulas,
ampollas, costras, ulceraciones y eritema. 20 (23.0 %) de los
pacientes con HS habían mostrado tres o más
recurrencias de la enfermedad el año anterior y además
habían sido tratados con Aciclovir. A las
mujeres se les exigió un test negativo de embarazo.
Diseño del estudio
terapéutico.
Previo consentimiento escrito, se inició la terapia
indicándosele la aplicación diaria del compuesto con
hisopo, tres veces al día por cinco días en los casos
de HS y durante diez días en los de HZ. Los controles
clínicos fueron requeridos a las 24 y 72 horas de iniciado
el tratamiento y a la primera y segunda semana del
mismo.
Tabla 3. Pacientes con herpes genital agrupados por
edad y sexo.
Fuente: Unidad de Dermatología. Hospital
Universitario de los Andes.
Efecto del tratamiento
Todos los pacientes con HS acusaron desaparición
del prurito y/o ardor y disminución importante del dolor en
los pacientes con HZ y del eritema en ambas entidades,
acompañado de inicio de la desecación de las
vesículas con formación de costras a las 72 horas. La
involución total del proceso ocurrió en menos de cinco
días en los pacientes con HS y HG y en menos de diez
días en los pacientes con HZ; ninguno de estos casos
reportó neuralgia postherpética. Solo 8 (14.8 %) de los
pacientes tratados con HS presentaron recurrencia durante los
doce meses siguientes. Estos pacientes al ser sometidos
nuevamente al esquema terapéutico no sufrieron recurrencia
durante el año subsiguiente al segundo tratamiento. Un
paciente que tenía el diagnóstico de HG desde
hacía 4 años no mostró mejoría con la
aplicación de la crema por lo que se realizó una
biopsia reportando una dermatitis crónica
asociada a infección bacteriana la cual respondió
satisfactoriamente a tratamiento antibiótico sistémico
y astringentes. Ningún paciente manifestó aumento de
los síntomas como consecuencia de la terapia
tópica.
Las afecciones herpéticas son procesos virales muy
frecuentes en las consultas hospitalarias y las mismas ocurren de
manera cíclica y con una marcada recurrencia. Hasta la fecha
no existe un tratamiento completamente eficaz; los existentes
presentan resultados contradictorios y en algunas oportunidades
desalentadores. El tratamiento utilizado más comúnmente
ha sido el Aciclovir pero el mismo es efectivo durante su
administración durante
largos períodos y en forma oral (Hirsch 1997, Mitchell et
al. 1981, Saral et al. 1981, Straus et al. 1984, Whitley
1997).
La mezcla alcaloidea extraída de Solanum
americanum Miller ha mostrado ser efectiva en el tratamiento
de las diferentes manifestaciones del herpes, sin efectos
irritativos locales, al menos en el control rápido de la
signosintomatología de las lesiones herpéticas y
además parece tener un efecto inhibitorio sobre el virus, ya
que el 85 % los pacientes con HS y la totalidad de los pacientes
con HG no han presentado recurrencia al año de iniciado el
tratamiento. Es frecuente en los pacientes con HS presentar
recurrencias en períodos que van de uno a seis meses.
Aún más, los pacientes que presentaron una segunda
recurrencia (14.8 %) y que fueron sujetos a un segundo
período de tratamiento no han presentado nuevamente los
síntomas en un período de un año.
Con respecto a las cremas utilizadas (Chataing 1996), se
puede decir que si bien las mismas contienen fundamentalmente
Solamargina y solasonina como glicoalcaloides, el incremento en
la proporción de Solamargina aumenta la actividad de la
crema en los diferentes tratamientos. Estos datos coinciden con los
resultados obtenidos por Thorne et al. (1985) en sus estudios
in vitro del Herpes simplex del tipo I en el cual
observan que algunos glicoalcaloides obtenidos de solanáceas
son efectivos en la inactivación del virus,
particularmente a-chaconina y en menor extensión
a- tomatina y
a-solasonina y una
carencia de actividad de las correspondientes agliconas
(solanidina, solasodina y tomatidina). La similaridad estructural
de los sacáridos que contienen en su estructura Solamargina y
chaconina sugieren que estos sacáridos son los involucrados
en la acción contra el
herpes.
Del presente estudio y los datos presentados en la
literatura (Chataing 1996, Thorne
et al. 1985), así como de los estudios de los efectos
toxicológicos de Solamargina (Méndez 1995, Méndez
et al. 1994) se recomienda el uso de este alcaloide en forma
tópica por su eficacia, además de su bajo
costo si se compara con otros
antivirales comercialmente accesibles.
El presente trabajo ha sido financiado por el CDCHTULA,
proyecto C-803-96 y
CDCHT-ULAFA-135-94-A.
Cham BE, Daunter B, Evans RA. 1991. Topical treatment of
malignant and premalignant skin lesions by very low
concentrations of a standard mixture (BEC) of solasodine
glycosides. Cancer Lett. 59:
183-192.
Chataing B, Concepción JL, Buitrago de Cristancho
N, Usubillaga A. 1996. Estudio clínico de la efectividad de
extractos alcaloides obtenidos de los frutos de Solanum
americanum Miller sobre Herpes simplex, Herpes zoster
y Herpes genital.. Rev. Fac. Farmacia. Univ. Los Andes 32:
18- 25.
Chataing B, Concepción JL, Lobaton R, Usubillaga A.
1998. Inhibition of Trypanosoma cruzi growth in
vitro by Solanum alkaloids: A comparison with
ketoconazole. Planta Médica. 64: 31-36.
Fewell AM, Roddick JG, Weissenberg M. 1994. Interactions
between the glycoalkaloids Solanine and Solamargine in relation
to inhibition of fungal growth. Phytochemistry
37:1007-1011.
Hirsch MS. 1997. Virus Herpes Simple. En: Mandell GL,
Bennett JE, Dolin R. (Eds). Enfermedades Infecciosas. Principios y Práctica. Ed.
Médica Panamericana. Buenos Aires.
1495-1506.
Huff JC, Bean B, Balfour HHJr. et al. 1988. Therapy of
herpes zoster with oral acyclovir. Am. J. Med. 85:
84-89.
Joklik WK, Willet HP, Amos DB. 1980. Herpes viruses. En:
Zinsser Microbiology. Appleton-Century-Croft. 1200-1207. Kupchan
SM, Barboutis SJ, Knox CA. 1965. -solamarine: tumor
inhibitor isolated from Solanum dulcamara. Science 150:
1827-1828.
Mahato SB, Sahu NP, Ganguly AN, Kasai R, Tanak O. 1980.
Esteroidal alkaloids from Solanum khasinum. Application of
13C-NMR spectroscopy to their structural elucidation.
Phytochemistry 19: 2017-2010.
Méndez R. 1995. Estudio de la toxicidad aguda del
compuesto BJ sobre ratas " Wistar" sanas. Tesis de Licenciatura en
Biología. Facultad de
Ciencias. Universidad de Los Andes.
Mérida. Venezuela.
Méndez R, LaCruz L, Chataing B et al. 1994. Efectos
toxicológicos de un alcaloide extraído de Solanum
nigrum . XXII Jornadas Venezolanas de Microbiología.
Mérida. Venezuela. 1994.
Mitchell CD, Bean B, Gentry SR et al.
1981. Acyclovir therapy for mucocutaneous Herpes simplex
infections in Immunocompromised Patients. Lancet, 1:
1392-1394.
Pittier H. 1978. Manual de Plantas Usuales deVenezuela.
Fundación Eugenio Mendoza. Caracas. Venezuela. Pompa G.
1982. Medicamentos Indígenas. Edit. América.
Caracas.
Roig y Mesa JT. 1974. Plantas Medicinales,
Aromáticas y Venenosas de Cuba. Ciencia y Técnica.
Instituto del Libro. La Habana,
Cuba.
Sacks S, Aoki F, Díaz-Mitema F et al. 1996. The
Canadian Famciclovir Study Group. Patient-initiated, twice daily
oral Famciclovir for early recurrent genital herpes. JAMA 276:
44- 49.
Saral R, Burns WH, Laski OL et al. 1981. Acyclovir
profilaxis of herpes simplex virus infection: A randomized
double-blind controlled trial in bone-marrow transplant
recipients. N. Eng. J. Med. 305: 63-67.
Spruance SL, Rea TL, Thoming C et al. 1997. For the
topical Penciclovir collaborative group. Penciclovir cream for
the treatment of Herpes simplex labialis: a randomized,
multicenter, double blind, placebo-controlled trial. JAMA 277:
1374-1379.
Straus SE, Takiff HE, Seidlin M, Bachrach S et al. 1984.
Suppression of frequently recurring genital herpes. N. Eng. J.
Med. 310:1545-1550.
Thorne HV, Clarke GF, Skuce R. 1985. The inactivation of
herpes simplex virus by some Solanaceae glycoalkaloids. Antiviral
Research 5: 335-343.
Whitley RJ. 1997. Virus Varicela-zoster. En: Mandell GL,
Bennett JE, Dolin R. (Eds). Enfermedades Infecciosas. Principios
y Práctica. Ed. Médica Panamericana. Buenos Aires.
1507-1509.
Whitley RJ, Weiss H, Gnann JW Jr. et al. 1996. National
Institute of Allergy and Infectious Diseases Collaborative
antiviral study group . Acyclovir with and without prednisone for
the treatment of Herpes zoster. Ann. Intern. Med. 125:
376-383.
Bernardo Chataing (*1)
(*) Dirección para
correspondencia: Bernardo Chataing. Facultad de Ciencias.
Universidad de Los Andes. Mérida, 5101. Mérida.
Venezuela.Tel (+58 74) 401302/711405. Fax (58 74) 401286.
En MedULA, Revista de Facultad de
Medicina, Universidad de Los
Andes. Vol. 7 Nº 1-4. 1998. Mérida.
Venezuela.
Nersa B. de Cristancho (2) y Alfredo Usubillaga
(3)
(1) Departamento de Biología. Facultad de Ciencias.
Universidad de Los Andes. (2) Unidad de Dermatología.
Facultad de Medicina y Hospital Universitario de los Andes. 3
Instituto de Farmacia. Facultad de Farmacia. Universidad de Los
Andes. Mérida, 5101. Mérida. Venezuela.