- Mecanismos de
Coloración - Tipos de
Tinción - Endósporas y
Levaduras - Las
Cápsulas - Bacillus
Cereus - Análisis de
Resultados
En su mayor parte los microorganismos son demasiado
pequeños para observarse a simple vista: protozoos, algas,
hongos,
bacterias y
virus.
Estos microorganismos difieren en características tales como forma de
nutrición,
estructura,
tamaño, composición entre otros aspectos; es por
ello que se emplea el estudio microscópico el facilita
notablemente la observación; principalmente en las bacterias se
facilita al tratarlas con colorantes o tintes los cuales
facilitan también la observación de ciertas estructuras
celulares.
En este informe vamos a
distinguir la estructura
intracelular de algunos microorganismos, tal es el caso de la
sarcina, Klecciela, Bacilo Serium entre otros. Desarrollamos los
métodos de
tinción y damos a conocer un análisis de los resultados obtenidos en la
práctica.
DESARROLLO:
La coloración celular y tejidos son una
combinación de fenómenos físicos y
químicos de absorción: los fenómenos
físicos de absorción, capilaridad y ósmosis
participan en cierto grado. La afinidad de colorantes
básicos por los tejidos ácidos y
viceversa indican que hay reacción química.
Los Colorantes:
Son compuestos, orgánicos que contienen radicales
cromóforos esto es que producen color y grupo de
anxocromos que forman sales los grupos nitrito
(-NO2) y azo (-N = N) son cromóforos. Los radicales
hidroxilo (-OH) y amino (-NH2) son grupos
anxocromos. Los cromóforos imparten la propiedad
cromógena al colorante y los anxocromos permiten que el
colorante se una con la fibra o tejido.
Preparación de Frotis Bacteriano para
Coloración:
Entes de la tinción las bacterias suelen
encontrarse en agua o en otro
líquido en un porta objeto limpio y son extendido en una
película uniforme y delgada. Se deja que la
película seque en el aire y los
microorganismos son fijados por sustancias químicas o por
el calor
moderado.
Tinciones:
Es un método
utilizado para estudiar microorganismos. (no vivos); en estas
tinciones se observa morfología, estructura y agrupamientos de
microorganismos.
Tinción Simple: utiliza un solo
colorante.
Tinción de Gram:
Utiliza varios colorantes (cristal violeta 1m, Yodo 1m,
lavado con alcohol,
Safranina 30 seg)
Tinción Ácido
Resistente:
Una vez teñidos, conservan su color resistiendo
al lavado con ácido mineral reducido. En esta
tinción las bacterias ácido resistentes conservan
el colorante primario color rosa o rojo, los demás
microorganismos son decolorados por el ácido y toman el
color azul.
Tinción de Giensa:
El colorante se aplica a un frotis de sangre y se
utiliza cuando se sospeche de protozoos en la sangre para
observar materias núcleos de la células.
Tinción de Esporas:
Se usa verde de malaquita en contraste con
safranina.
Tinción de Cápsula:
Colorante nigrosuna, aquí se observa
microorganismos encapsulados creando resistencias.
Tinción de Flagelos:
Se usa mordiente el cual aumenta el tamaño del
microorganismo.
Son unos cuerpos resistentes que se producen en el
interior de la célula
los cuales contienen los componentes necesarios para conservar la
vida.
Las esporas pueden situarse en el centro de la célula o
en situaciones excéntricas cerca de un extremo de la
misma.
Levaduras:
Son esféricas, elípticas y
cilíndricos, su tamaño varía notablemente.
Son hongos cuya forma
corriente y dominante de crecimiento es unicelular.
Son estructuras
grueso viscosas gelatinosas que rodean las células de
algunas especies.
Sarcina:
Son anaerobios obligados y son extremadamente
ácido – tolerantes que pueden fermentar
azúcares y crecer a pH inferior a
2.
Este género
comprende 2 especies de bacterias que se dividen en tres planos
perpendiculares para producir paquetes de 8 en una célula.
La mayoría se encuentra en el suelo o en
partículas de polvo en suspensión y son uno de los
organismos del género
Bacillus que pueden ser aislados fácilmente.
Puesto que los formadores de esporas pueden aislarse
selectivamente a partir del suelo, alimentos o de
otro material dejando las muestras a 80 ºC durante 10
minutos.
Los bácillus suelen crecer en medios
sistemáticos que contengan azúcares, ácidos
orgánicos, alcoholes,
etc, como única fuente de carbono y
amoníaco como única fuente de
nitrógeno.
Existe varios tipos de tinciones de loas cuales
estudiamos:
- Tinción de Gram
- Tinción simple
- Tinción de esporas
Tinción de Gram:
Dividida en gram positivo y gram negativo, en el caso de
los gram (+) la muestra fue
sarcina, puesto que una tonalidad violeta fijada en su estructura
determina la presencia de la misma puesto que fijó en su
estructura el cristal violeta.
Y en el gran (-) utilizamos salmonella identificada por
la presencia de muchas estructura un poco triangulares de color
rojo.
En la muestra de la
práctica anterior 3 eran gran positivo por su
coloración morada.
Tinción Simple:
Estudia levaduras, en este experimento se usa un solo
colorante que fue azul de metileno, donde observamos que las
levaduras tenían cocos. Estas células bacterianas
difieren desde el punto de vista químico de su medio
exterior y por eso se tiñen contrastando con su
alrededor.
Tinción de Esporas:
La bacteria es una estructura muy pequeña, sin
embargo, por medio de esta tinción pudimos observar la
estructura interna de la célula
bacteriana, particularmente las endosporas, en este experimento
se utiliza una tinción simple debido a que la misma
permite que se coloree toda la célula excepto la espora
que se observa de un tamaño bien aceptable.
Documento cedido por:
JORGE L. CASTILLO T.