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Bacteriología – Corynebacterium, Bacillus y Clostridium




Enviado por francisco74



    Bacteriología – Corynebacterium,
    Bacillus y Clostridium

    RESUMEN.

    En esta práctica realizamos el aislamiento
    y la identificación de los microorganismos pertenecientes
    a los géneros Corynebacterium, Bacillus y
    Clostridium.

    Llevamos a cabo el cultivo de microorganismos en
    placas con agar sangre para
    Bacillus, cuya muestra fue
    tomada del aire, en placas
    con agar sangre más
    telurito y una placa sólo con agar sangre para
    Corynebacterium, y una placa con agar sangre y un tubo
    con caldo tioglicolato más carne para Clostridium,
    cuya muestra
    fué tierra.

    Desafortunadamente no hubo desarrollo de
    microorganismos en la placa con agar sangre más
    telurito, ni en la placa con agar sangre, por lo tanto no
    desarrollo
    Corynebacterium. En la placa con agar sangre para
    Bacillus tampoco hubo desarrollo. En
    la placa con agar sangre para Clostridium hubo desarrollo de
    colonias diferentes entre sí, en cuanto al tubo hubo
    desplazamiento del tapón de cera con lo que podemos
    concluir que el microorganismo realizó una fermentación.

    OBJETIVOS.

    * Llevar a cabo el aislamiento y desarrollo de
    los microorganismos pertenecientes a las especies Bacillus,
    Clostridium y Corynebacterium
    .

    JUSTIFICACION.

    Los microorganismos transmitidos por el aire se controlan
    mediante técnicas físicas o agentes
    químicos. El aire simplemente
    representa un ambiente
    especial para su aplicación. En las áreas que
    reciben contaminación doméstica y son ricas
    en nutrientes orgánicos, predominan las bacterias
    coliformes, estreptococos fecales, especies de Bacillus,
    Proteus, Clostridium,
    y muchas otras.

    Las bacterias
    Bacillus , Clostridium y Corynebacterium se agrupan en
    la familia
    Bacillaceae, las cuales se caracterizan por presentar
    células
    en forma de bastones. Todas las especies producen
    endosporas.

    Estas bacterias se
    encuentran en toda la naturaleza, en
    el agua,
    suelo e
    incluso en el conducto intestinal de animales. La
    resistencia
    natural de las esporas que producen les permite sobrevivir largos
    períodos, cuando son transportadas por el aire.

    Es por todo lo anterior muy importante saber
    identificarlos por medio de tinciones de gram, de esporas y de
    gránulos metacromáticos y así poder
    determinar cuando son causantes de alguna enfermedad en el
    humano.

    INTRODUCCION.

    Bacillus.

    El género Bacillus está
    compuesto por bacilos grampositivos grandes caracterizados por su
    capacidad para producir endosporas. El género incluye
    microorganismos aerobios estrictos y anaerobios facultativos.
    Bacillus anthracis es causante de enfermedad en el ser
    humano. Muchas otras especies están distribuidas en la
    naturaleza y
    se hallan en la mayor parte de las muestras de suelos, agua y polvo.
    Ciertos miembros de dicho género han adquirido importancia
    como productores de antibióticos. (1)

    Bacillus
    anthracis.

    El carbunco (enfermedad de los animales
    herbívoros, ovinos y bovinos, equinos, porcinos y
    caprinos) es causado por el B. anthacis, un bacilo
    grampositivo aerobio y formador de esporas. Es un bacilo recto
    que mide de 3 a 5 micras de largo y de 1 a 1.2 micras de ancho,
    es inmóvil. Están encapsulados durante la
    proliferación en el animal infectado.
    (1)

    Características de su
    cultivo.

    Proliferan bien en placas con agar sangre. La
    proliferación máxima se obtiene con un pH de 7-7.4 en
    condiciones aerobias, pero se produce desarrollo en ausencia de
    oxígeno. (1)

    Identificación de laboratorio.

    Ni los aspectos morfológicos ni las
    características de cultivo habituales
    permiten diferenciar al B. anthracis de las cepas
    inmóviles de B. cereus, el microorganismo con el
    que más fácilmente se confunde. Sin embargo, las
    cepas virulentas de B. anthracis son los únicos
    microorganismos que producen colonias rugosas cuando proliferan
    en ausencia de un mayor nivel de CO2 y colonias
    mucoides cuando proliferan en un medio con bicarbonato de sodio
    en una atmósfera con un 5%
    de CO2. (1)

    Resistencia.

    Debido a su capacidad para producir esporas, el
    bacilo del carbunco es sumamente resistente a los ambientes
    químicos y físicos adversos. Una temperatura de
    120oC durante 15 min puede inactivar a las esporas.
    Las esporas permanecen viables durante años en las
    pasturas contaminadas. (1)

    Determinantes de la
    patogenicidad.

    La patogenia del B. anthracis depende de
    dos factores de virulencia importantes: una cápsula poli
    (ácido D-glutámico) y una exotoxina. La
    cápsula interfiere en la fagocitosis. Los efectos letales
    se deben a una exotoxina que consiste en tres proteínas
    características y serológivamente
    activas: el antígenos protector (PA), el factor de edema
    (EF) y el factor letal (LF). (1)

    Epidemiología.

    La incidencia del carbunco en el hombre es
    baja. En la actualidad casi todos los casos ocurren en personas
    no vacunadas que trabajan en las hilanderías y en lugares
    donde se trabaja con fieltro. (1)

    Patogenia.

    Los seres humanos se infectan de una de tres
    formas:

    1. La vía cutánea. Los
      microorganismos acceden a través de pequeñas
      abrasiones o cortes y se multiplican.
    2. Inhalación. Los microorganismos son
      inhalados, se multiplican en los pulmones y son barridos hacia
      los ganglios linfáticos hiliares de drenaje, donde se
      rpoduce una necrosis hemorrágica.
    3. Ingestión. Rara vez los microorganismos
      son ingeridos en carne infectada, con ella resultante
      invasión y ulceración de la mucosa
      gastrointestinal. (1)

    Bacillus cereus.

    Es una causa de enfermedad transmitida por los
    alimentos que
    se reconoce con poca frecuencia. Tiene una morfología
    celular similar a la del B. anthracis pero a diferencia de
    éste en general es móvil y no es susceptible a la
    penicilina o al gama-fago. (1)

    La intoxicación alimentaria por B.
    cereus
    puede causar dos síncromes
    clínicos:

    1. tiene un periodo de incubación breve de
      cuatro horas. Se caracteriza por náuseas y
      mitos
      severos y con frecuencia se confunde con la intoxicación
      alimentaria estafilocócica.
    2. tiene un periodo de incubación
      más prolongado (17 hrs) y se caractería por cólicos abdominales
      y diarrea. Habitualmente se confunde con la intoxicación
      alimentaria por clostridios. (1)

    Clostridium.

    Los clostridios son bacilos grandes
    móviles, grampositivos y anaerobios, muchos descomponen
    proteínas, forman toxinas o ambas cosas. Su
    hábitat natural es el suelo o el
    intestino de los animales y
    el hombre,
    donde viven como saprófitos. Entre los patógenos se
    encuentran los causantes del botulismo, tétanos, gangrena
    gaseosa y colitis seudomembranosa. (2)

    Morfología e
    identificación.

    Las esporas de clostridios tienen un
    diámetro mayor al de los bastoncillos en los cuales se
    forman. Casi todos los clostridios son móviles y poseen
    flagelos perítricos.(2)

    Cultivo.

    Crecen solamente en condiciones de anaerobios,
    mediante el método de
    Gaspack o mediante medios
    líquidos en tubos de ensaye con tejidos de
    animales
    (carne picada). (2)

    Forma de las colonias.

    Algunos microorganismos producen colonias grandes,
    elevadas, con bordes enteros, otros producen colonias más
    pequeñas, cuyos bordes se extienden en forma de red de finos filamentos.
    Muchos clostridios producen una zona de hemólisis en agar
    de sangre. (2)

    Características del
    crecimiento.

    Los bacilos anaerobios son incapaces de utilizar
    el oxígeno como aceptor final de hidrógeno; carecen
    de citocromo y de citocromoooxidasa y son incapaces de destruir
    el peróxido de hidrógeno porque carecen de catalasa
    y peroxidasa. Pueden fermentar una variedad de azúcares;
    muchos digieren proteínas.
    (2)

    Características
    antigénicas.

    Comparten antígenos, pero también
    poseen antígenos específicos solubles que permiten
    agruparlos por medio de pruebas de
    precipitación. (2)

    Clostridium
    botulinum.

    Se le encuentra en el suelo y
    ocasionalmente en heces de animales. Es
    causante del botulismo. Sus esporas son resistentes al calor.
    (2)

    Toxina.

    Conforme se va desarrollando y durante la
    autólisis de la bacteria, la toxina se libera al medio. Se
    conocen siete variedades antigénicas de toxina. Estas
    toxinas se encuentran entre las sustancias más
    tóxicas que son conocidas. Su producción está bajo el control de un gen
    viral. (2)

    Patogenia.

    El botulismo es una intoxicación resultante
    de la ingestión de alimentos en los
    cuales C. botulinum se ha desarrollado y ha producido
    toxina. Los alimentos
    causantes más comunes, son los alimentos
    empacados al vacío o los ahumados. Las esporas germinan en
    tales alimentos, La
    toxina bloquea la producción o la liberación de
    acetilcolina en las uniones sinápticas y neuromusculares.
    (2)

    Datos clínicos.

    Síntomas: trastornos visuales, incapacidad
    para deglutir y dificultad para hablar, parálisis bulbar,
    muerte debida
    a parálisis respiratoria o paro cardiaco.
    (2)

    Pruebas diagnósticas de laboratorio.

    La toxina se puede demostrar con frecuencia en el
    suero de los pacientes y ésta se encuentra en los restos
    de comida no ingerida. Puede identificarse el tipo
    antigénico de la toxina por neutralización con
    antitoxina específica. También se puede utilizar
    hemaglutinación pasiva o radioinmunoensayo.
    (2)

    Clostridium
    tetani.

    Es el causante del tétanos. Se han
    distinguido varios tipos por sus antígenos flagelares
    específicos. Todos ellos comparten un antígeno O
    (somático) común y todos producen el mismo tipo
    antigénico de neurotoxina, tetanospasmina.
    (2)

    Toxina.

    Las células
    vegetativas de C. tetani producen la tetanospasmina y la
    liberan cuando se lisan. La producción de toxna está controlada
    por un gen plásmido. La toxina intracelular es un
    polipéptido que las enzimas
    proteolíticas desdoblan en dos fracciones de alta
    toxicidad. Actúa en varias formas sobre el sistema nervioso
    central. Inhibe la liberación de acetilcolina
    interfiriendo con la transmisión neuromuscular. Inhibe las
    neuronas posinápticas de la médula espinal por el
    bloqueo de la liberación de un mediodador inhibidor, esto
    resulta en espasmos musculares generalizados, ataques
    súbitos. (2)

    Corynebacterium.

    Este género incluye un grupo de
    bacterias
    heterogéneas. Las características comunes de los miembros de
    este género incluyen:

    1. bacilos pleomófricos
      grampositivos;
    2. falta de formación de
      endosporas;
    3. estallido cuando se dividen las células,
      con la formación de letras chinas;
    4. metabolismo aerobio o anaerobio
      facultativo;
    5. reacción positiva para catalasa
      y
    6. reacción positiva para citocromooxidasa.
      (3)

    Las especies de Corynebacterium encontradas
    con mayor frecuencia en los laboratorios clínicos como
    patógenos oportunistas de huéspedes comprometidos o
    como agente causal de difteria incluyen:

    1. diphtheeriae, ulcerans, aquaticum,
      pseudodiphthericum (hofmannii), xerosis, renale,
      pseudotuberculosis (ovis), bovis, minutissimum, haemolyticum,
      pyogenes, equi, matruchotii. (3)

    Habitat.

    Son comunes en suelo y agua y residen
    en piel y mucosas
    de humanos y animales. El aislamiento continuo de especies de
    Corynebacterium de sangre, LCR y otros líquidos
    corporales que normalmente son estériles sugiere que el
    microorganismo puede ser responsable de un proceso
    infeccioso. (3)

    Enfermedades.

    La difteria es una enfermedad aguda, contagiosa y
    febril causada por C. diphtheriae . Esta enfermedad se
    caracteriza por una combinación de inflamación
    local con formación de seudomembranas en la orofaringe y
    daño al corazón y
    nervios periféricos ocasionado por la acción
    de una poderosa exotoxina. Este microorganismo es diseminado por
    convalecientes y portadores sanos por vía
    respiratoria.Durante la infección el microorganismo crece
    en la nasofaringe o en algún lugar del tracto respiratorio
    superior y elabora una exotoxina que produce necrosis e
    inflamación superficial de la mucosa. Esta es absorbida a
    través de la mucosa y trasportada por vía
    circulatoria a órganos distantes. Estos son el corazón y
    el sistema nervioso
    periférico. (3)

    1. ulcerans también produce una
      toxina parecida a la anterior. Algunas cepas elaboran una
      segunda sustancia tóxica que no es una exotoxina.
      (3)

    Otras especies de Corynebacterium
    asociadas con humanos causan enfermedad sólo en raras
    circunstancias. C. hofmannii, un habitante normal de la
    faringe, ha sido recuperado de la sangre de pacientes con
    endocarditis bacteriana subaguda. C. xerosis, encontrado
    en los sacos conjuntivales, ha sido recuperado de pacientes con
    endocarditis valvular protésica. (3)

    MATERIAL.

    * Para Bacillus:

    – 1 placa con agar sangre

    * Para Corynebacterium:

    1 placa con agar
    sangre

    -1 placa con agar sangre +
    telurito

    * Para Clostridium:

    – 1 placa con agar sangre

    – 1 tubo con caldo tioglicolato + carne de res
    con un tapón de parafina.

    RUTA CRITICA.

    *
    Bacillus.

    Abrir la caja para ponerla incubar a 37°C
    Placa con agar en contacto con el aire 48
    hrs.sangre

    Observar macro y
    microscópicamente.* Clostridium.
    Tierra

    Incubar a 37°C Observar características 48 hrs. macro y
    microscópicas.Caldo tioglicolato+ carne de res
    contapón de parafina.*
    Corynebacterium.

    Incubar a 37°C observar durante 48 hrs.
    características macro y micros-Inocular y sembrar
    cópicas.una muestra de
    Corynebacteriumen una placa de agar
    sangre

    Realizar lo mismo que lo anterior con la placa de
    agar sangre con telurito

    .RESULTADOS.

    placa con agar sangre:No hubo desarrollo de
    Bacillus*

    Placa con agar sangre + telurito:No hubo
    desarrollo alguno de Corynebacterium*

    Placa con agar sangre:No hubo desarrollo alguno
    de Corynebacterium

    * Placa con agar sangre:Hubo desarrollo de
    colonias muy diferentes entre sí.Se tomó una
    colonia café, de aspecto butiráceo, 2 mm de
    diámetro.-

    Tinción de Gram: bacilos gram(+)-
    Tinción de espora: sí se observó la
    presencia de espora Por todo lo anterior podemos deducir que se
    trataba de un Clostridium.

    * Tubo con caldo tioglicolato + carne de res con
    tapón de parafina:Hubo desarrollo de microorganismos ya
    que se observó una turbidez y aparte el tapón se
    desplazó hacia arriba, indicando la producción de gas.

    – Tinción de Gram: bacilos
    gram(+)

    – Tinción de espora: sí se
    observó la presencia de espora.Por todo lo anterior
    podemos concluir que se trataba de un
    Clostridium.

    OBSERVACIONES.* El caldo tioglicolato
    tiene radicales tio (SH) al igual que la carne de res que se le
    agrega, y con todo esto lo que se pretende es quitar todo el
    oxígeno del medio, ya que este se utiliza para los
    microorganismos del género Clostridium, que son
    anaerobios estrictos.

    CONCLUSIONES.

    * Los Bacillus son bacilos G(+), pueden
    ser o no esporulados, móviles o invóviles.
    Desarrollan en forma de estreptobacilos con terminaciones
    redondeadas. Pueden presentar gránulos
    metacromáticos o endoesporas.

    * El género Corynebacterium
    presenta gránulos metacromáticos, se pueden
    observar en forma de L o V, empalizadas, cuerpo de maso. Pueden
    ser o no capsulados, móviles o inmóviles y no
    esporulados.

    * El género Clostridium es un
    bacilo que se observa como embarazado, pueden ser
    móviles o inmóviles, capsulados o no capsulados,
    esporulados. Es un anaerobio estricto.

    • ARTICULO
    • "TRATAMIENTO DE LAS INFECCIONES VAGINALES
      RESISTENTES."
    • La vaginitis aguda afecta a la mayoría
      de las mujeres en algún momento de su vida adulta. La
      vaginitis crónica o recurrente es más que una
      molestia. El punto más importante es establecer el
      diagnóstico correcto. Muchos
      médicos complementan el diagnóstico con estudios de laboratorio
      como el pH vaginal,
      la prueba de amina y el frotis microscópico preparado
      con solución salina o hidróxido de potasio al
      10%.Se ha observado que la mayoría de las mujeres con
      vaginitis resistente son tratadas para un diagnóstico equivocado. En caso de duda
      se sugiere efectuar un cultivo para hongos.Candidiasis.La candidiasis
      vulvovaginal recurrente (CVVR) es la forma habitual de
      vaginitis resistente. Los síntomas son prurito
      crónico, ardor, irritación y dispareunia.
      Candida albicans es la causal de 80 a 90% de las
      CVVR.Tricominiasis.Se establece el diagnóstico con un examen
      microscópico y cultivos para tricomonas. Vaginosis
      bacteriana.Su diagnóstico debe confirmarse con la
      medición del pH, prueba
      de amina y análisis microscópico.
      (4)
    • BIBLIOGRAFIA.(1). JAWETZ. Microbiología Médica. Editorial El
      Manual Moderno.
      15ª edición. 1996. Pp.834,835,836,837,838. (2).
      ZINSSER. Microbiología. Editorial
      Médica-Panamericana, 20ª edición.. 1997. Pp.
      208,209,210,211.(3). KONEMAN. Diagnóstico
      Microbiológico. Editorial Médica – Panamericana.
      3ª edición. 1998. Pp. 469,470, 472,474.(4).
      INFECTOLOGIA. No 5. Año 1996.

    " BACILOS GRAM (+)."

     

     

    Autor:

    Francisco Javier Cruz
    Hernández

    francisco74[arroba]hotmail.com

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